亚细胞定位（亚细胞定位原理）
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亚细胞定位
亚细胞定位是指某种蛋白或表达产物在细胞内的具体存在部位。如仅在核内存在，还是胞质内存在，还是细胞膜上存在。GFP实际是给你要研究的物质加上标记。使用GFP必须构建融合蛋白载体，并有效表达。
亚细胞定位的信号界面就相当于是一些船上面的还有一些卫星设备上面的定位是一样的，就是有一段波长和一个检测信号的装置。
一般来说，常见的植物亚细胞定位载体包括GFP、DsRed、mCherry等。其中，GFP是一种绿色荧光蛋白，用于标记细胞或亚细胞结构； DsRed和mCherry是红色荧光蛋白，适用于单细胞或组织水平的染色。
真核细胞亚细胞定位实验的原理及步骤?
1、亚细胞定位是指某种蛋白或表达产物在细胞内的具体存在部位。如仅在核内存在，还是胞质内存在，还是细胞膜上存在。GFP实际是给你要研究的物质加上标记。使用GFP必须构建融合蛋白载体，并有效表达。
2、一般真核细胞基因组DNA有107-9bp，可以从新鲜组织、培养细胞或低温保存的组织细胞中提取，常是采用在EDTA以及SDS等试剂存在下用蛋白酶K消化细胞，随后用酚抽提而实现的。
3、功能基因研究中，经常会进行基因编码的蛋白质的亚细胞定位的，如待定位蛋白和GFP、YFP、RFP等融合后，观察融合蛋白在细胞内的定位，或者将预测部位（如该蛋白可能在液泡膜上）的蛋白提取出来，进行western实验，来验证等。
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亚细胞定位只能打烟草吗
1、根据目的和研究对象选择合适载体。选择植物亚细胞定位载体时，需要考虑到研究目的和研究对象的不同，选择合适的载体。一般来说，常见的植物亚细胞定位载体包括GFP、DsRed、mCherry等。
2、长出叶片。烟草长出叶片后，就可以利用农杆菌将外源基因导入到烟草叶片中进行表达，可以借此进行蛋白的亚细胞定位了。烟草（学名：NicotianatabacumL.）是茄科烟草属植物，一年生或有限多年生草本，全体被腺毛；根粗壮。
3、用共聚焦显微镜看。亚细胞定位，其用到的方法基本都是融合报告基因定位法，通过瞬转烟草叶片或原生质体在共聚焦显微镜下拍照观察到的结果。
4、这是动物还是植物细胞工程？看起来像植物，双元载体的话，质粒应该比较大，应该不是打基因枪或是原生质体了，一般是用农杆菌侵染烟草表皮瞬时转化吧。
5、-3天。根据查询亚细胞定位实验得知，在便携式长波长紫外灯下检测GFP荧光信号灯下，亚细胞定位烟草侵染后遮光2-3天之后，是最佳表达时段，才可以提取蛋白，检测蛋白的含量。
6、烟草亚细胞定位有信号真核细胞和原核细胞的区别是看是否有以核膜为界的细胞核。 按照以前老教材的解释就是：原核细胞是没有核膜包围的细胞核的。 在真核细胞中细胞核内是有细胞质存在的。
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